Το φθινοπωρινό σκουλήκι, το Spodoptera frugiperda, είναι ένα από τα σημαντικότερα παράσιτα του καλαμποκιού, που εισέβαλε στην Κίνα πρόσφατα.Για τον προσδιορισμό της επίδρασης ελέγχου του Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) στις προνύμφες του SΓια το S. frugiperda, η εντομοκτόνη δράση και η επίδραση βιοελέγχου του AcMNPV στον S. frugiperda μελετήθηκαν και αναλύθηκαν με τις μεθόδους βιοεξέτασης και δοκιμής αποτελεσματικότητας στο πεδίο.Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η διάμεση θανατηφόρα συγκέντρωση (LC50) του AcMNPV που ενεργεί με βάση το άρθρο 2νΤο ποσοστό των λορβών του S.Frugiperda ήταν 2,9x107Η μέση αποτελεσματικότητα ελέγχου 107PIB/mL AcMNPV+Bt αναστολή ((1500 mL/hm2) για το S. frugiperda ήταν 68,99% στις 10ΗΗ Ελλάδα είχε, επίσης, υψηλότερη αύξηση κατά 66,87% στις 15 Ιουλίου.ΗΤελικά, το λογισμικό DNAMAN 6.0 χρησιμοποιήθηκε για να προσδιοριστεί η ομολογία DNA των νεκρών εντόμων και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η polh,Οι αλληλουχίες γονιδίων lef-8 και lef-9 των νεκρών εντόμων και του S.Frugiperda ήταν 100% πανομοιότυπεςΌλα τα ανωτέρω αποτελέσματα θα μπορούσαν να επαληθεύσουν περαιτέρω ότι το AcMNPV μπορεί να διαδραματίσει βασικό ρόλο στον έλεγχο του S.Frugiperda.7Ακαθάριστο Ακαθάριστο Ακαθάριστο Ακαθάριστο Ακαθάριστο Ακαθάριστο Ακαθάριστο ΑκαθάριστοBtεναιώρημα (1500 ml/ μm)2) θα πρέπει να εφαρμόζεται κατά την κορυφή της εμφάνισης των νεαρών προνύμφων του S.frugiperda και μετά τις 16:00-5:00 μ.μ. σε ηλιόλουστες ημέρες για να αποφευχθεί η επίδραση της υψηλής θερμοκρασίας και του φωτός,ώστε το παρασκεύασμα του ιού να μπορεί να διαδραματίσει καλύτερο ρόλο και να βελτιώσει την επίδρασή του στον έλεγχο του S- Φρουτζίπερντα.
AcMNPV; Spodoptera frugiperda; Lepidopteranpest; προνύμφη; βιο-πετοκτόνοAcMNPV+Bt Αναστολή· εντομοκτόνη δραστηριότητα · πράσινη πρόληψη και καταπολέμηση
Το Spodoptera frugiperda είναι ένα ολικοφάγο μεταναστευτικό παράσιτο που εισήλθε για πρώτη φορά στην Κίνα από τη Μιανμάρ το 2019 και έχει εξαπλωθεί γρήγορα σε 1.518 επαρχίες σε 26 επαρχίες και δήμους της Κίνας,που αποτελεί σοβαρή απειλή για την επισιτιστική ασφάλεια της ΚίναςΜέχρι τώρα, στην στρατηγική ελέγχου του Armyworm, ο έλεγχος της επιδημίας του armyworm εξακολουθεί να εξαρτάται από την έντονη χρήση χημικών φυτοφαρμάκων.Η υπερβολική χρήση χημικών φυτοφαρμάκων μπορεί εύκολα να προκαλέσει ανθεκτικότητα των παρασίτων, τα αpiοτελέσατα του piολιτισμού και τη διατήρηση των piολιτιστικών αpiοθέσεων.χρήση βιολογικών μεθόδων ελέγχου ή υποκατάσταση βιοφαρμάκωνΗ χρήση φυτοφαρμάκων για τον έλεγχο του Armyworm γίνεται όλο και πιο σημαντική και έχει λάβει αυξανόμενη προσοχή.
Ο Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus AcMNPV είναι ένας πολλαπλών κόκκων ενσωματωμένος πυρηνικός πολυέδρος ιός που απομονώνεται από τη προνύμφη της αλφαρίδας Argyria.Μπορεί να μολύνει διασταυρούμενα περισσότερα από 30 είδη επιβλαβών λεπιδοπτεροειδών, όπως το πεταλούδι, αλεύρι λάχανο, Argyria argyra, και Calyptera teristoides,Ο μικτός τύπος με Bt και άλλα εντομοκτόνα και μη στοχευόμενους ιούς επιβλαβών οργανισμών ως συνεργικούς παράγοντες έχει προφανή συνεργική επίδραση σε πολλούς επιβλαβείς οργανισμούς Noctuidae.Το AcMNPV είναι ένα νέο βιοπεσιτικό του ιού των εντόμων που αναπτύχθηκε από την εταιρεία Wuhan Unioasis Biological Technology Co., LTD.Είναι ένας συνδυασμός του ιού πυρηνικής πολυεδρότητας Argyria alfalfa και του ισχυρού συνεργικού ιού Bt.Με καλή εντομοκτόνη δράση, το Α έχει εφαρμοστεί ευρέως στα λαχανικά, στα φρούτα, στο ρύζι και σε άλλους τομείς. the insecticidal activity and biocontrol effect of Autographa californica mul-tiple nucleopolyhedrovirus(AcMNPV) against Spodoptera frugiperda were detected and evaluated by laboratory activity assay and field experiment, προκειμένου να παρέχεται υποστήριξη δεδομένων για την ευρεία εφαρμογή του ιού πυρηνικής πολυεδρότητας στον βιολογικό έλεγχο των Spodoptera frugiperda στο καλαμπόκι.Παρέχει θεωρητική βάση για την καταχώριση και την εφαρμογή του παράγοντα αναστολής του AcMNPV συν Bt στον έλεγχο του Armyworm.
Ο ιός που εξετάστηκε ήταν ο Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) Στις 20 Μαΐου 2019, το Spodoptera frugiperda συλλέχθηκε από το χωράφι καλαμποκιού στην πόλη Xiantao, επαρχία Hubei,και η δοκιμή ελέγχου της λοίμωξης από ιό διεξήχθη στο εργαστήριο της εταιρείας βιολογικής τεχνολογίας Wuhan Unioasis.., LTD. (στο οποίο ο Autographa Californica multiplenucleopolyhedrovirus AcMNPV έχει υψηλή μολυσματική δραστηριότητα κατά των Spodoptera frugiperda),Οι προνύμφες του Spodoptera frugiperda μεγάλωσαν για να αναπτυχθούν και να πολλαπλασιαστούνΟι νεκρές προνύμφες που είχαν μολυνθεί από τον ιό έλιωσαν με νερό, φιλτράρισαν μέσα από 3 στρώματα γάζας και το φίλτρο φυγοκέντρωσε με 600r/min και 300r/min.10ιός πολυεδρών ανά mL ((Πολυεδρών, συμπεριλαμβανομένου του σώματος PIB), δηλαδή για να λάβουμε έναν καθαρό τεχνικό βαθμό του ιού πολυεδρών ((1.8 x 1010PIB/mL), διατηρούνται σε χαμηλή θερμοκρασία και απομακρύνονται.
Ο βιολογικός παράγοντας που δοκιμάστηκε ήταν η Autographa california nuclear polyhedrosis.Bacillus thuringiensis για σύντομη ονομασία AcNPV.Bt ((1.0 * 107 PIB/mL).LTD και παράγεται από την θυγατρική της Wuhan Chuqiang Biological Technology Co.., LTD.
Το πειραματικό έντομο ήταν το Spodoptera frugiperda. Στις 20 Ιουλίου 2019, οι προνύμφες του Spodoptera frugiperda συλλέχθηκαν από το καλοκαιρινό χωράφι καλαμποκιού στο χωριό Banqiao, πόλη Dachangzhen,Περιφέρεια Tongshan, της επαρχίας Hubei, και μεταφέρθηκε πίσω στο εργαστήριο του Ινστιτούτου Έρευνας Φυτικής Προστασίας εδάφους και λιπασμάτων της Ακαδημίας Γεωργικών Επιστημών Hubei.Τα φρέσκα και τρυφερά φύλλα καλαμποκιού τροφοδοτήθηκαν με ένα κεφάλι σε πλαστικά δοχεία Petri (διάμετρος 8cm)Οι συνθήκες διατροφής σε εσωτερικούς χώρους ήταν: 25 ± 1 °C και σχετική υγρασία 60% - 70%, η φωτοπερίοδος είναι 16L: 8D. Μετά από πολλαπλές γενιές αναπαραγωγήςδιατηρούνται για χρήση φρέσκα και αποστειρωμένα κύτταρα αυγών.
Έξι κλίμακες συγκέντρωσης, 1,0 * 109, 1,0 * 108, 1,0 * 107, 1,0 * 106, 1,0 * 105, 1,0 * 104Πρώτα, η TC του AcNPV αραιώθηκε σε 1,0 * 10.9Το πείραμα υποβλήθηκε σε επεξεργασία με κενό έλεγχο.με κάθε διαδικασία να επαναλαμβάνεται 3 φορές.
Υιοθετήθηκε η μέθοδος τροφοδοσίας με τμήματα φύλλων, δηλαδή τα νέα φύλλα φρέσκου καλαμποκιού (μήκος 2 cm * πλάτος 2 cm) αρχικά υποβλήθηκαν σε επεξεργασία με ψεκασμό εναιώρησης ιού, στη συνέχεια τα προνύμφια τροφοδοτήθηκαν,και τα μονοκεφάλια τα τάιζαν σε πιάτα Πέτρι.Οι λωρίδες τροφοδοσίας ήταν: θερμοκρασία (25±1) °C, στάδιο υγρασίας (60% ~ 70%), φωτοπερίοδος (16L:8D).48 δεύτερο στάδιο προνύμφες του Armyworm υποβλήθηκαν σε επανειλημμένη θεραπεία.Αναφορά μέρος 9{9-11}, Λαμβάνοντας υπόψη τις αλλαγές στον πολλαπλασιασμό του ιού στα κύτταρα και τους ξενιστές της οικογένειας των νυχιών,ο αριθμός των νεκρών εντόμων λόγω του ιού και ο συνολικός αριθμός των νεκρών εντόμων ερευνήθηκαν 7 και 10 ημέρες μετά τη μόλυνση, και υπολογίστηκε το ποσοστό θνησιμότητας και υπολογίστηκε το LC50.
Η δοκιμή αποτελεσματικότητας του πεδίου διεξήχθη στο πεδίο καλαμποκιού καλοκαιριού του χωριού Xiaoyuan, της πόλης Chuangwang, της επαρχίας Tongshan, της επαρχίας Hubei.２, ο τύπος εδάφους είναι ασβεστιακός, η τιμή pH είναι 6.8, η περιεκτικότητα σε οργανική ουσία είναι 13,9%, και η γονιμότητα είναι μέση έως υψηλή.Το καλαμπόκι φυτεύεται όλο το χρόνο και η ποικιλία καλαμποκιού είναι Xiyu No. 3.2020, 45% σύνθετο λίπασμα 750 kg/hm２Από το 2019, υπήρξε μια σοβαρή εμφάνιση του Φθινοπωρινού Στρατιωτικού Σκουλήκου σε αυτό το πεδίο.
Συνολικά 10 εκατομμύρια αναστολές AcMNPV.BT (1500 ml/ hl)2∆ιαλύματα ινδοκαρβίου (300 ml/ ml)2Οι ερευνητές διαπίστωσαν ότι οι ερευνητές δεν ήταν σε θέση να διαπιστώσουν αν οι ερευνητές ήταν σε θέση να διαπιστώσουν αν οι ερευνητές ήταν σε θέση να2
Το απόγευμα της 26ης Αυγούστου 2020 (όταν οι προνύμφες του Spodoptera frugiperda εμφανίζονται συχνά), ψεκάστε το φυτοφάρμακο μία φορά το βράδυ.Χρησιμοποιείται το ηλεκτρικό σπρέι πολλαπλών λειτουργιών του σακιδιού Lebang 3WBJ-16DZΗ ημέρα εφαρμογής φυτοφαρμάκου είναι ηλιόλουστη, με θερμοκρασία 23-32 °C.Διενέργεια ερευνών την 1ηΚατά τη διάρκεια της έρευνας, ελήφθησαν 10 τυχαία σημεία δειγματοληψίας από κάθε οικόπεδο και ερευνηθήκαν συνεχώς 10 φυτά σε κάθε σημείο,συνολικά 100 φυτάΟ αριθμός των ζωντανών εντόμων, των θανάτων, της δηλητηρίασης και των φυσικών εχθρών σε κάθε καλαμπόκι καταγράφηκε.
Ποσοστό μείωσης των εντόμων = ((αριθμός ζώντων εντόμων πριν από την εφαρμογή - αριθμός ζώντων εντόμων μετά την εφαρμογή) /αριθμός ζώντων εντόμων πριν από την εφαρμογή)
Επίδραση πρόληψης και ελέγχου=(Μείωση του ποσοστού εντόμων στην περιοχή επεξεργασίας- Μείωση του ποσοστού εντόμων στην περιοχή ελέγχου)/(100- Μείωση του ποσοστού εντόμων στην περιοχή ελέγχου) *100%
1) Δείγματα του ιού δοκιμής. Επιλέξτε το μητρικό υγρό ACMNPV για τον προσδιορισμό της δραστηριότητας σε εσωτερικούς χώρους (δείγμα 1), βιολογικό παρασκεύασμα 10 εκατομμύρια ACMNPV.Bt SC (δείγμα 2),πτώματα εντόμων που έχουν μολυνθεί από ιό μετά από δοκιμές αποτελεσματικότητας στο πεδίο (δείγμα 3), και οι προνύμφες δεύτερης γενιάς του armyworm που έχουν μολυνθεί με πτώματα εντόμων που συλλέγονται στο δείγμα 3 (δείγμα 4) ως δείγματα του ιού δοκιμής, για να επαληθευθεί αν το AcMNPV στα 10 εκατομμύρια ACMNPV.Το Bt έχει βακτηριοκτόνη δράση κατά των προνύμφων του σκουληκιού του στρατού της πτώσης.
2) Εξόρυξη DNA. Πάρτε 1,0 ml δείγματος AcMNPV, προσθέστε 99,0 ml αποσταγμένου νερού, και ταλαντεύστε προσεκτικά για 1 λεπτό. Πάρτε 300μL εναιώρημα μετά την ταλαντεύση, προσθέστε 100μL αλκαλικό διάλυμα ρωγμών,νερού 37 °C για 30 λεπτά. Προσθέστε 200μL Tris·HCl buffer και φυγοκεντρώστε με 10000 r/min για 8 λεπτά. Πάρτε το υπερυψωμένο σε φυγοκεντρωτικό σωλήνα, προσθέστε 5μL πρωτεάσης K και 60μL SDS, νερό στο 65 °C για 2 ώρες,αφαιρείται και ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου. Προσθέστε 650μL Mix L Tris κορεσμένης φαινόλης, φυγοκεντρώστε με ταχύτητα 10000 r/min για 5 λεπτά και μεταφέρετε το υπερεπιβατικό σε νέο φυγοκεντρωτικό σωλήνα.Προστίθενται 650μL υγρού μίξης φαινόλης και χλωροφόρμου (απόσταση όγκου 1Ως εκ τούτου, η μέθοδος αυτή πρέπει να χρησιμοποιείται για την αποθήκευση των υλικών που περιέχονται στο μείγμα, για την αποθήκευση των υλικών που περιέχονται στο μείγμα και για την αποθήκευση των υλικών που περιέχονται στο μείγμα.φυγοκέντρωση με 10000 στροφές/δευτερόλεπτο για 5 λεπτάΜετρήστε τη συγκέντρωση του DNA χρησιμοποιώντας ένα φασματοφωτομέτρο.
Χρησιμοποιώντας το τυποποιημένο σύστημα T3 super mix: δείγμα DNA 2 μ L. 0,5 μ L primers για πριν και μετά, T3 super mix 18 μ L και ddH2O7 μ L. Η συνθήκη ενίσχυσης PCR είναι 95 °C.Μετά από 3 λεπτά προαποκατάστασης, εκτελούνται οι ακόλουθοι κύκλοι: 98 °C για 15 δευτερόλεπτα, 52 °C για 20 δευτερόλεπτα, 72 °C για 20 δευτερόλεπτα και, τέλος, 72 °C για 5 λεπτά, συνολικά 42 φορές κύκλος.
4) Ηλεκτροφορέση με τζελ αγαρόζης DNA. Πάρτε το προϊόν ενίσχυσης PCR 2μL και 5 kb DNA Marker και βάλτε το σε τζελ αγαρόζης, και ηλεκτροφορέστε το σε 180 V για 20 λεπτά. Μετά την ηλεκτροφορέση,να παρατηρούν τα προϊόντα PCR στο σύστημα απεικόνισης με τζελ.
Πρωτότυπο Polh ανωτέρω:
ΓΓΓΤΤΚΑΓΓΤΚΑΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓ
Πρωτογενής polh:
ΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓ
Λεφ-8 προετοιμαστικό άνω:
ΑΓΓΤΤΚΑΓΤΚΑΓΚΑΓΚΑΓΚΑΓΚΑΓΚΑΓΚΑΓΚΑ
Λεφ-8 προετοιμαστικοί:
ΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓ
Λεφ-9 προετοιμαστές άνω του ποταμού
ΑΓΓΤΤΚΑΓΓΤΚΑΓΑΑΑΑΑΑΑΓΓΓΤΑΑΑΓΓΓΓΓΓΓ
Λεφ-9 προετοιμαστικοί προς τα κάτω:
ΓΑΓΓΓΑΤΑΤΤΤΚΑΤΤΤΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓΓ
Τέλος, εφαρμόστε το λογισμικό DNAMAN6.0 για να συγκρίνετε τις μετρούμενες ακολουθίες polh, lef-8 και lef-9.
Τα πειραματικά δεδομένα επεξεργάστηκαν χρησιμοποιώντας το λογισμικό στατιστικής ανάλυσης δεδομένων IBM SPSS 22.0.
Στο πείραμα προσδιορισμού της εντομοκτόνης δραστηριότητας του ιού, μετράται ο αριθμός των νεκρών και των ζωντανών εντόμων που έχουν υποβληθεί σε επεξεργασία με κάθε συγκέντρωση,και υπολογίζεται το ποσοστό θνησιμότητας και το προσαρμοσμένο ποσοστό θανάτωνΗ συγκέντρωση κάθε επεξεργασίας μετατρέπεται σε τιμές lg.Η εξίσωση παλινδρόμησης ιαισθησίας (πλήρωση ± SE) υπολογίζεται μέσω τιμών πιθανότητας εργασίας και βαρών., και LC50Αξία και το 95% όριο εμπιστοσύνης του, και τελικά να εκτελέσει δοκιμή chi τετράγωνο (((2Στο πείραμα ελέγχου επιπτώσεων πεδίου, μετρήθηκε ο αριθμός των ζωντανών εντόμων σε κάθε επεξεργασία, υπολογίστηκε ο ρυθμός μείωσης των επιβλαβών οργανισμών.Το αποτέλεσμα ελέγχου υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας τη φόρμουλα επεξεργασίας του Microsoft ExcelΓια την ανάλυση χρησιμοποιήθηκε η μέθοδος Duncan και για τη σύγκριση των σημαντικών διαφορών μεταξύ των θεραπειών χρησιμοποιήθηκε μονόδρομος ANOVA.
Τα διαγράμματα στο κείμενο δημιουργήθηκαν όλα χρησιμοποιώντας το λογισμικό Microsoft Excel.
Τα αποτελέσματα των δοκιμών δραστηριότητας σε εσωτερικούς χώρους (Πίνακας 1) δείχνουν ότι μετά από 7 ημέρες θεραπείας, το LC50του AcMNPV που δρα στις προνύμφες του 2ου σταδίου του Spodoptera frugiperda είναι 4,1x107ΠΟΕ/mL και ΛΚ90είναι 1,05 x 108Μετά από 10 ημέρες θεραπείας, η LC50Το ποσοστό δράσης του AcMNPV στις προνύμφες του 2ου σταδίου είναι 2,9x107ΠΟΕ/mL και ΛΚ90είναι 7,8x107ΑΕΠ/mL. Το LC50και LC90Οι επιδράσεις του AcMNPV στις προνύμφες του 2ου σταδίου του φθινοπωρινού σκουλήκι του στρατού μετά από 7 ημέρες θεραπείας ήταν και οι δύο υψηλότερες από 10 ημέρες,που δείχνει ότι το AcMNPV παρουσίασε καλή εντομοκτόνη δράση κατά των προνύμφων των Spodoptera frugiperda στις 7 ημέρες.
Τα αποτελέσματα των δοκιμών αποτελεσματικότητας έδειξαν ότι 10 εκατομμύρια AcMNPV.2Η μέση επίδραση ελέγχου την 1η, 3η και 5η ημέρα μετά τον ψεκασμό ήταν 11, 57%, 16, 23%, και 15, 56%, αντίστοιχα.Το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου την 7η ημέρα μετά την ψεκασμό ήταν μόνο 21 mg/ kg.Ωστόσο, την 10η ημέρα μετά τον ψεκασμό, το αποτέλεσμα ελέγχου των εντόμων αυξήθηκε ξαφνικά στο 68,99%, και το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου την 15η ημέρα μετά τον ψεκασμό ήταν επίσης 66,87%.Σε σύγκριση με τα χημικά παράγοντα Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioner2Η μέση επίδραση ελέγχου στις 1η, 3η, 5η, 6η, 7η, 8η, 8η και 8η ημέρες της ημέρας ήταν πολύ χαμηλή.και την 7η ημέρα μετά τη χορήγηση φαρμάκων ήταν 91Ωστόσο, το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου την 10η ημέρα άρχισε να μειώνεται, μόνο στο 67, 63%,και το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου την 15η ημέρα είχε μειωθεί σε 510,60%, βλέπε πίνακα 2 για λεπτομέρειες.
Ταυτόχρονα, διαπιστώσαμε επίσης ότι το ποσοστό μείωσης των εντόμων στην περιοχή ελέγχου ήταν αρνητικό την 1η, 3η και 5η ημέρα μετά τη θεραπεία, γεγονός που δείχνει αύξηση του αριθμού των εντόμων.Την 7η ημέρα μετά τη θεραπείαΤο μέσο ποσοστό μείωσης των εντόμων την 10η και την 15η ημέρα ήταν 38,25% και 47,00% αντίστοιχα.που είναι πολύ πιθανό να σχετίζεται με το γεγονός ότι ορισμένες από τις προνύμφες των spodoptera frugiperda άρχισαν να μαλλιάζουν στο έδαφος και οι γενιές επικαλύπτονται μετά από 10-15 ημέρες..
Συνοπτικά, μπορεί να παρατηρηθεί ότι τα 10 εκατομμύρια AcMNPV.2Το φάρμακο αυτό έχει μια ορισμένη επίδραση στον έλεγχο των spodoptera frugiperda, αλλά η επίδρασή του είναι αργή και η αποτελεσματικότητά του είναι περίπου 10-15 ημέρες μετά την εφαρμογή.
Κατά τη διάρκεια πειραμάτων πεδίου, ερευνήθηκαν επίσης οι επιδράσεις 10 εκατομμυρίων αναστολών AcMNPV. Bt σε φυσικούς εχθρούς των επιβλαβών οργανισμών στο καλαμπόκι, όπως αράχνες, παπαγάλες και σκαθάρια.Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι 10 εκατ.Το Bt δεν είχε σημαντική βλάβη στους φυσικούς εχθρούς όπως οι αράχνες, οι κολοκύθες και τα σκαθάρια, με μέσο όρο 13,4 φυσικούς εχθρούς ανά 100 φυτά.οι χημικοί παράγοντες Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioningarb 15% εναιώρημα είχαν σημαντική τοξική επίδραση στους φυσικούς εχθρούς όπως οι αράχνεςΤην πρώτη μέρα μετά τη θεραπεία, ο μέσος αριθμός των φυσικών εχθρών σε 100 φυτά καλαμποκιού ήταν μόνο 3.1Το ποσοστό αυτό είναι μικρότερο από το ποσοστό που παρατηρήθηκε στις άλλες περιοχές της Κοινότητας.Το εναιώρημα Bt έχει καλή προστατευτική επίδραση στους φυσικούς εχθρούς των επιβλαβών οργανισμών, ενώ η Emamectin Benzoate+ Indoxair Conditioning, 15% αναστολή, προκαλεί σχετικά μεγαλύτερη βλάβη στους φυσικούς εχθρούς.
Τα αποτελέσματα ενίσχυσης PCR διαφορετικών δειγμάτων δοκιμής έδειξαν ότι τα θραύσματα ενίσχυσης polh, lef-8 και lef-9 των δειγμάτων 1, 2, 3 και 4 ήταν συνεπή και σωστό μεγέθους.Τα προϊόντα PCR της polyh, lef-8 και lef-9 γονίδια ήταν 0.540, 0.716, και 0,29 kb, αντίστοιχα (Σχήμα 2), γεγονός που αποδεικνύει ότι το AcMNPV έχει εντομοκτόνη δράση κατά των προνύμφων των spodoptera frugiperda.
Τέλος, χρησιμοποιήθηκε το λογισμικό DNAMAN 6.0 για την εκτέλεση ευθυγράμμισης αλληλουχίας στα ενισχυμένα θραύσματα polh, lef-8 και le.f-9 στα δείγματα 1, 2, 3 και 4 (Σχήμα 3).Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι η ομοιότητα μεταξύ των ενισχυμένων ακολουθειών polh, lef-8 και lef-9 στα δείγματα 1, 2, 3 και 4 ήταν 100%, γεγονός που δείχνει ότι τα δείγματα 1, 2, 3 και 4 προέρχονται από τον ίδιο ιό AcMNPV.
Ο ιός πολλαπλασιάζεται και εξαπλώνεται σε όλο το σώμα του εντόμου.Επικρατεί σταδιακά σε όλο το σώμα και τελικά οδηγεί στο θάνατο.Τα αποτελέσματα της παρούσας μελέτης δείχνουν ότι το AcMNPV έχει καλή βιολογική δράση κατά των προνύμφων των Spodoptera frugiperda.αντίστοιχαΤο μεικτό εναιώρημα των 10 εκατομμυρίων AcMNPV.Bt (1500 ml/hm2Η εικόνα της ομάδας των ερευνητών που συμμετείχαν στην έρευνα έδειξε καλή μέση επίδραση ελέγχου στις 10η και 15η ημέρες μετά τη θεραπεία, φθάνοντας το 68, 99% και το 66, 87% αντίστοιχα, και ήταν ασφαλής για τους φυσικούς εχθρούς.η ταχύτητα της έρευνας και της ανάπτυξης θα πρέπει να επιταχυνθεί ώστε το AcMNPV να μπορεί να διαδραματίσει μεγαλύτερο ρόλο στον βιολογικό έλεγχο των Spodoptera frugiperdaΤο 10 εκατομμύρια AcMNPV.Bt εναιώρημα που παράγεται από την Wuhan Chuqiang Biotechnology Co., Ltd. είναι μια ένωση AcMNPV και του βιοπεστικοκτόνου Bacillus thuringiensis (Bt),που μπορεί να βελτιώσει σημαντικά την εντομοκτόνη δράση του ιούΕπειδή το Bt είναι ένα εντομοκτόνο ευρέος φάσματος με καλή μικροβιακή εντομοκτόνη δράση, όταν το AcMNPV συνδυάζεται με το Bt, η τοξικότητά του θα πρέπει να βελτιωθεί σημαντικά σε σύγκριση με μια ενιαία σύνθεση..Αυτό όχι μόνο διευρύνει το εντομοκτόνο εύρος της Bt, αλλά επίσης ενισχύει την τοξικότητά της, επιτυγχάνοντας τον στόχο της χρήσης μιας ενιαίας σύνθεσης για τον έλεγχο πολλαπλών παρασίτων.Αυτό είναι επίσης ο λόγος για τον οποίο η αναστολή των 10 εκατομμυρίων AcMNPVΤο.Bt μπορεί να προωθηθεί ευρέως στα λαχανικά, στα οπωροφόρα δέντρα και στο ρύζι. Ως εκ τούτου, 10 εκατομμύρια AcMNPV.Bt μπορούν να προωθηθούν ως πράσινος παράγοντας ελέγχου του Spodoptera frugiperda στο αραβόσιτο
Στην παρούσα μελέτη, κατά τη διενέργεια δοκιμών αποτελεσματικότητας στο πεδίο, σε περίπτωση ραγδαίας μείωσης του πληθυσμού εντόμων στην περιοχή ελέγχου (το ποσοστό μείωσης των εντόμων την 15η ημέρα έφτασε το 47,00%),το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου των 10 εκατομμυρίων AcMNPV.Βt εναιώρημα (1500 ml/μm)2Ενώ το μέσο αποτέλεσμα ελέγχου του χημικού φυτοφαρμάκου 15% μεθοξαζόλη · ιντεφενκαρβ SC (300 ml/mH) ήταν2Αν και μπορεί να παρατηρηθεί ότι το 10 εκατομμύρια AcMNPV.2) έχει μια ορισμένη επίδραση στον έλεγχο των Spodoptera frugiperda από την 10η έως την 15η ημέρα,λαμβάνοντας υπόψη την αργή αποτελεσματικότητα των βιολογικών φυτοφαρμάκων και τη σύντομη διάρκεια ζωής και τις επικαλυπτόμενες γενιές των προνύμφων των Spodoptera frugiperda, συνιστάται να αυξηθεί ο αριθμός των ερευνών και να παραταθεί ο χρόνος των ερευνών κατά τη διεξαγωγή δοκιμών αποτελεσματικότητας σε πεδίο των βιολογικών φυτοφαρμάκων (ιδιαίτερα των ιογενών παρασκευασμάτων),που μπορεί να επιτύχει πιο ιδανικά πειραματικά αποτελέσματαΣυνοπτικά, σε σύγκριση με τους βιολογικούς παράγοντες, οι χημικοί παράγοντες έχουν σχετικά υψηλότερη δράση θανάτωσης των επιβλαβών οργανισμών και έχουν γρήγορη δράση.Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως μέτρο πρόληψης και ελέγχου έκτακτης ανάγκης κατά τη διάρκεια εκδηλώσεων παρασίτωνΌταν η βλάβη από τα παράσιτα είναι σχετικά ελαφριά, τα βιολογικά φυτοφάρμακα μπορούν να αντικαταστήσουν τα χημικά φυτοφάρμακα ως ένα από τα πράσινα μέτρα πρόληψης και ελέγχου.μειώνοντας έτσι την περιβαλλοντική ρύπανση και επιτυγχάνοντας την προστασία της γεωργικής οικολογίας.
Επιπλέον, το γονίδιο Polh (πολυεδρίνη) που χρησιμοποιήθηκε στην παρούσα μελέτη είναι ένας τύπος πολυεδρικού προωθητή πρωτεΐνης, το οποίο και το P10 είναι ο πιο συχνά χρησιμοποιούμενος προωθητής στο σύστημα φορέων έκφρασης βακουλοϊού (BEVS),και τα δύο εκφράζονται σε υψηλό βαθμό στο τελευταίο στάδιο της ιογενούς λοίμωξης[13]Ωστόσο, η δραστηριότητα του προωθητή p10 είναι χαμηλότερη από εκείνη του προωθητή polh, έτσι ο προωθητής polh χρησιμοποιείται συχνά για την έκφραση εξωγενών πρωτεϊνών.Το γονίδιο lef-8 μπορεί να κωδικοποιήσει τη μεγαλύτερη υπομονή της RNA πολυμεράσης του ίδιου του ιού, και είναι ένας τύπος συντελεστή αργής έκφρασης[14]Το lef-9 είναι ένας τύπος παράγοντα καθυστερημένης έκφρασης που κωδικοποιεί την υπομονάδα του συμπλέγματος πρωτεϊνών με το lef-4, lef-8 και p47 στους βακουλοϊούς.Έρευνες έχουν διαπιστώσει ότι οι ιοί που στερούνται του γονιδίου lef-9 δεν μπορούν να παράγουν σωματίδια ιού με μολυσματική δραστηριότητα, ενώ οι ιοί με το γονίδιο lef-9 μπορούν να αποκαταστήσουν τη μολυσματική δραστηριότητα του ιού αποκαθιστώντας την.το γονίδιο lef-9 είναι ένα απαραίτητο γονίδιο για τον βακουλοϊό για να σχηματίσει BV (Budded Virus) με μολυσματική δραστηριότητα[15]Μπορεί να παρατηρηθεί ότι τα γονίδια lef-8 και lef-9 έχουν υψηλό συντηρητισμό σε διαφορετικούς τύπους ιών πυρηνικής πολυεδρικής,Έτσι τα γονίδια lef-8 και lef-9 μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως βάση για την αναγνώριση των τύπων ιώνΩς εκ τούτου, η μελέτη αυτή χρησιμοποίησε polh, lef-8 και lef-9 ως αντικείμενα ανίχνευσης, και μέσω της ευθυγράμμισης της γονιδιακής αλληλουχίας, η ομολογία ήταν υψηλή, φτάνοντας όλα στο 100%.Η μέθοδος ταχείας μοριακής ανίχνευσης επαλήθευσε για άλλη μια φορά ότι το AcMNPV έχει καλή εντομοκτόνη δράση κατά των Spodoptera frugiperda, το οποίο είναι κατάλληλο για περαιτέρω προώθηση και εφαρμογή στην πρόληψη και τον έλεγχο του Spodoptera frugiperda.
Από το 2019, το Spodoptera frugiperda εισέβαλε στην Κίνα και έγινε ένα σημαντικό παράσιτο του καλαμποκιού.προκαλώντας τεράστιες απώλειες στη βιομηχανία καλαμποκιού της Κίνας και απειλώντας σοβαρά την επισιτιστική ασφάλεια της Κίνας[16]Με δεδομένη την τρέχουσα σοβαρή κατάσταση πρόληψης και ελέγχου του Spodoptera frugiperda στην Κίνα,είναι επείγον να επιταχυνθεί ο έλεγχος και η ανάπτυξη αποτελεσματικών φυτοφαρμάκων για την πρόληψη και τον έλεγχο των Spodoptera frugiperda[17]Παρόλο που τα ιογενή εντομοκτόνα έχουν περιορίσει την ευρεία εφαρμογή τους λόγω της αργής ταχύτητας δράσης τους και του στενού εντομοκτόνου φάσματος,στο πλαίσιο της αυξανόμενης προσοχής στην οικολογία και την προστασία του περιβάλλοντος, τα εντομοκτόνα βακουλοϊού αναμένεται να χρησιμοποιηθούν όλο και περισσότερο στη γεωργική παραγωγή λόγω των σημαντικών πλεονεκτημάτων τους έναντι των παραδοσιακών φυτοφαρμάκων.Λόγω της ευαισθησίας των παρασκευασμάτων ιών εντόμων σε εξωτερικές συνθήκες, όπως υψηλή θερμοκρασίαΣυνεπώς, συνιστάται η χρήση φυτοφαρμάκων κατά την περίοδο αιχμής εμφάνισης των προνύμφων των παρασίτων.00 μ.μ. σε ηλιόλουστες ημέρες για να αποφευχθεί η επίδραση των δυσμενών περιβαλλοντικών συνθηκών, όπως η υψηλή θερμοκρασία και το φως, έτσι ώστε η σύνθεση του ιού να μπορεί να διαδραματίσει καλύτερα το ρόλο της και να βελτιώσει την επίδραση του ελέγχου των επιβλαβών οργανισμών.